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产品规格
售价
备注
DEM201-20T
20T
¥450.00
生化分析试剂盒
DEM201-50T
50T
¥850.00
生化分析试剂盒
产品描述
产品简介
本产品是利用 M-MLV 逆转录酶 (Reverse Transcriptase, RTase)从 Total RNA 合成 First Strand cDNA 的试剂盒，试剂盒含有的 M-MLV逆转录酶可以高特异性从具有复杂高级结构的 RNA合成高质量全长 cDNA。在本试剂盒反应体系中， M-MLV 逆转录酶中还含有 RNA 酶抑制剂（RNase Inhibitor），可以抑制 RNA 的降解。
试剂盒组成
| 组份编号 | 组份名称 | 规格 | 数量 |
| DEM201-1 | Reaction Buffer（5×） | 250 μl/管 | 1 |
| DEM201-2 | dNTP Mixture (10 mM each) | 100 μl/管 | 1 |
| DEM201-3 | Oligo dT Primer (50 μM) | 50 μl/管 | 1 |
| DEM201-4 | Random Primers (50 μM) | 50 μl/管 | 1 |
| DEM201-5 | M-MLV RTase (200 U/μl) | 100 μl/管 | 1 |
| DEM201-6 | RNase Free H2O | 2 ml/管 | 1 |
| ─ | 说明书 | 份 | 1 |
需要而未提供的器材
1. 系列可调节量程移液器及吸头
2. 干净的试管、离心管及 PCR 管或 PCR 八联管
3. PCR 仪
储存条件
-20℃储存， 保质期 12 个月。
注意事项
1. 试剂盒使用过程中， 冰浴放置。
2. 本产品仅限专业人员用于科学研究，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明
1. 请按下表配制逆转录反应体系Ⅰ
| 组份 | 体积 |
| RNase Free H2O | 6 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) | 2 μl |
| Oligo dT Primer or Random Primer | 1 μl |
| Total RNA | 1 μl (1-2μg) |
| Total volume | 10 μl |
2. 完成上述反应体系配制后， 将装有反应液的 PCR 管或 PCR 八联管放入 PCR 仪中， 65℃保温 5 min，使模板 RNA 变性，以促进具有复杂空间结构的 RNA 被充分逆转录。
3. 完成 RNA 变性反应后，再配制以下逆转录反应体系Ⅱ
| 组份 | 体积 |
| Solution from step 2 | 10 μl |
| Reaction Buffer （5×） | 4 μl |
| M-MLV RTase (200 U/μl) | 2 μl |
| RNase Free H2O | 4 μl |
| Total volume | 20 μl |
4. 将装有反应液的 PCR 管或 PCR 八联管放入 PCR 仪中， 按以下条件进行逆转录反应：42℃ 30 min; 85℃ 5 min; 冰浴冷却后， 4℃保存，以用于后续 PCR 实验。
参考文献
1. L. B. Klickstein, R. L. Neve, E. A. Golemis, J. Gyuris, 2001. Conversion of mRNA into double-stranded
cDNA. Curr Protoc Mol Biol. Chapter 5: Unit 5.5.
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