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产品规格
售价
备注
DE0009-1ml
1ml
¥50.00
PCR/RT-PCR/qPCR
DE0009-5ml
5ml
¥180.00
PCR/RT-PCR/qPCR
产品描述
产品描述:
本制品是将PCR反应所需的Taq酶、dNTPs、MgCl2以及反应缓冲液预先配制成2倍浓度的混合物。2×PCR Master专为常规PCR扩增反应优化,扩增长度可达8kb,能对4kb及其以下长度的片段进行高效地扩增。使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,大大地简化了操作过程,减少了PCR操作过程中的污染。经测试,染料的加入不影响PCR反应,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
产品特点:
高效:以λDNA为模板,扩增长度可达8kb,能高效扩增≤4kb片段。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
稳定:反复冻融几十次,4℃放置30天,室温放置一周后,扩增性能不受影响。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
便利:PCR反应后可直接电泳(含染料形式)。
产品用途:
1)常规PCR鉴定;
2)小片段目标基因克隆;
3)平端PCR产物加A。
使用建议:
使用本试剂扩增得到的PCR产物3´端有一突出"A"碱基,可直接克隆于T载体中。
保存温度:-20℃
质量保证:
经检测无外源核酸酶残留,qPCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。
常用反应体系(50μl)
2×PCR Master | 25μl |
上游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
下游引物 | 0.2-1.0μM(终浓度) |
模板 | 1-50ng(质粒) 10ng-1μg(基因组) |
ddH2O | 至50μl |
*Mg2+终浓度为2mM
常用PCR循环
注意事项:
1) 需要溶解完全后使用,防止离子浓度不均匀。
2) 应根据实验目的选择合适的循环数,循环数过少,会造成扩增量不足;循环数过多,扩增量增加,但突变率也会增加,并造成特异性扩增。
3) 根据引物Tm值设置合适退火温度,退火温度过低,会造成非特性扩增,过高可能扩增不到。