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UEIris II RT-PCR System for First-Strand cDNA Synthesis (with dsDNase)
  • 产品货号:
    BN12028
  • 中文名称:
    UEIris II RT-PCR System for First-Strand cDNA Synthesis (with dsDNase)
  • 品牌:
    Biorigin
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN12028-20μL×20T

    20μL×20T

    ¥478.00

  • BN12028-20μL×100T

    20μL×100T

    ¥1900.00

产品描述

产品规格:20 μL×20T, 20 μL×100T

产品内容

image.png

* MasterMix 包含以下组分:逆转录酶,RNA 酶抑制剂,dNTPs, buffer, Oligo(dT)20和随机引物。
储存条件:储存于-20℃,有效期见外包装。

产品介绍 

     UEIris II RT-PCR System for First-Strand cDNA Synthesis 是将RNA合成cDNA的一个操作更为简便的系统, 含有第一链 cDNA 合成所需的全部试剂,仅需加入 RNA 模板,dsDNase 和水即可进行逆转录反应。合成的第一链 cDNA 可广泛应用于第二链合成、杂交、PCR 扩增、 Real Time PCR 反应等。

UEIris II 预混液中的逆转录酶是全新开发的新一代逆转录酶。该酶具有更快的反应速度,只需 10 min 即可完成逆转录反应。该逆转录酶还具有产物得率更高、获得的 cDNA 片段更长、模板使用范围更广等特点。

    试剂盒中的 dsDNase 特异性消化双链 DNA,而不消化单链 DNA 和 RNA,并且具有热敏感性,可在 55℃快速地不可逆失活,实现去除基因组污染与逆转录反应同步完成。

使用方法

1. 在冰浴的无核酸酶的离心管中配制下列逆转录体系:

image.png

2. 轻轻混匀,瞬时离心(使液体沉于底部); 

3. 在 PCR 仪上进行下列条件的反应: 37℃温育 2 分钟,去除基因组污染 55℃,孵育 10 min(若目标 RNA 小于 3 kb,可适当缩短反应时间至 5 min) 85℃,10 sec 

4. 将获得的产物迅速置于冰上或立即保存于-20℃,用于后续实验。

注意事项 

    1. RNA 模板的纯度和完整性是影响逆转录效果的重要因素, 如模板中含有蛋白、EDTA、酚等杂质或 RNA 降解。 

    2. 若后续实验为 qPCR,逆转录产物的加量应不超过PCR 体系终体积的 1/10,如 20 μL 的 PCR 反应体系,逆转录产物的加量应不超过 2 μL。 

    3. 预混液中已经包含 Oligo(dT)20VN 和随机引物,不仅适用于包 Poly(A) 结构的真核生物 mRNA,也适用于不含 Poly(A)结构的原核生物 RNA、真核生物 rRNA 和 tRNA 等 模板,但不适用于 miRNA 等小 RNA 模板。